Stocker, manipuler et développer les micrographies électroniques

La préparation des spécimens, l’évaluation microscopique et la technique photographique font partie des défis auxquels un spécialiste de la micrographie électronique doit faire face. Cependant, c’est grâce à cette image photographique finale du spécimen que vous pouvez évaluer et communiquer vos résultats. Vous pouvez atteindre la qualité, l’uniformité et la répétitivité que vous recherchez pour vos micrographies électroniques en suivant quelques principes fondamentaux lorsque vous stockez, manipulez et développez vos produits de micrographie électronique:  

• Stockage des films de ME 
• Manipulation en chambre noire et utilisation de lampes inactiniques 
• Éviter les marques statiques 
• Développement des films de ME 

Stockage des films de micrographie électronique

Les films de micrographie électronique (ME) sont des produits photographiques susceptibles de s’altérer avec le temps en raison de leurs propriétés particulières. Ces altérations peuvent s’accélérer si les films sont soumis à une chaleur excessive, une hygrométrie relative élevée et une interaction chimique avec des matériaux qui ne sont pas photographiquement inertes (tels que certaines matières plastiques, solvants, laques, peintures et gaz).
Un stockage très prolongé ou dans des conditions défavorables peut résulter en une perte de vitesse, une intensification du voile, une modification du contraste ou une combinaison de tous ces effets. Vous pouvez prolonger la durée de vie de vos films ME en respectant les quelques règles suivantes.
Films non exposés
Évitez, en règle générale, l’excès de température et d’humidité. Les films de micrographie électronique peuvent être stockés à température ambiante (si celle-ci ne dépasse pas les 21 °C) dans leur emballage d’origine, résistant à l’humidité, à une hygrométrie relative de 50 %.
Temps de réchauffage après stockage au froid
Pour éviter que de la condensation d’humidité ne se forme sur les surfaces froides de films, laissez-les se réchauffer et atteindre la température ambiante avant d’ouvrir le paquet étanche à la vapeur. Les temps de réchauffage dépendent de l’espace créé entre chaque carton pour une meilleure circulation de l’air à la sortie du stockage au froid. Cette durée est de 2 heures si les films ont été gardés au réfrigérateur et de 3 heures s’ils ont été au congélateur.
Films exposés
Développez les films aussi rapidement que possible après leur exposition pour éviter de détériorer l’image latente. Vous pouvez garder les films ME exposés pendant environ 72 heures si la température ne dépasse pas les 24 °C et l’hygrométrie relative est inférieure ou égale à 50 %. Si vous êtes obligé de stocker les films pour une durée prolongée, mettez-les au réfrigérateur, dans une boîte ou un bocal étanche, pour les protéger de l’humidité. Ne laissez pas les films exposés sur plateaux plus longtemps que nécessaire.
Films développés
Pour pouvoir conserver les films ME sur une longue durée, il faut être particulièrement attentif lors des procédures de développement. Consultez la section « Développement pour une image stable » de cette publication et suivez les instructions au pied de la lettre. Les négatifs et tirages ME peuvent être stockés à des températures normales inférieures ou égales à 21 °C. Vous devez les garder à un endroit sec, dont l’hygrométrie relative se situe entre 30 et 50 % : en dessous de 30 %, les films deviennent excessivement friables, tandis qu’une valeur au dessus de 60 % favorise le développement des moisissures et champignons. Il est préférable de maintenir la température et l’humidité à des valeurs constantes. Si la température venait à augmenter modérément sur une brève période, les films ne devraient pas souffrir tant que l’humidité relative est inférieure à 40 %. Les températures supérieures à 24°C associées à une hygrométrie relative supérieure à 60 % accélèrent le développement de moisissure et de champignons, la détérioration de l’image et l’adhésion des films les uns aux autres ou le ternissement de la surface des négatifs.
Protégez vos négatifs et tirages des vapeurs de certains composés de soufre (tels que l’hydrogène sulfurique ou le gaz de charbon) et des émissions d’oxydes d’azote, de peroxydes, de formaldéhyde, d’ozone et de tout autre gaz oxydant nocif. Bien que les peintures au latex ne posent aucun problème, les vapeurs provenant de peintures à base d’huiles peuvent causer une décoloration importante. Ne remettez pas des négatifs dans un endroit qui vient d’être peint avec des peintures à base d’huiles pendant au moins 4 semaines.

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Manipulation en chambre noire et utilisation de lampes inactiniques

Comme l’émulsion et les côtés latéraux des films peuvent se rayer facilement si on les manipule brutalement et que des doigts mouillés peuvent laisser des traces sur les surfaces, il est nécessaire d’observer quelques mesures de précaution lors de la manipulation des produits photographiques ME dans la chambre noire. Les principes de base suivants vous permettront d’éviter les embûches les plus courantes lors de la manipulation en chambre noire.

Vérifiez qu’aucune lumière ne filtre dans la pièce de chargement et de développement des films. Pour cela, éteignez toutes les lumières et restez dans la pièce pendant environ 10 minutes. Au cours de cette période, vos yeux vont s’adapter à l’obscurité et vous serez alors en mesure de voir toute lumière qui filtre par des fentes autour de la porte, par les conduites de ventilation ou de chauffage ou par d’autres endroits.
Avant d’éteindre les lumières et de charger ou développer les films, assurez-vous que tous les objets dont vous avez besoin sont à portée de main. Si vous conservez les films exposés dans leurs boîtes d’origine, pensez à le marquer clairement. Ne gardez pas les boîtes de négatifs exposés et celles de films non exposés ensemble pour éviter d’exposer un matériau à deux reprises.
Respectez les recommandations au sujet des conditions d’éclairage inactinique indiquées sur la notice accompagnant les paquets de films. Pour en savoir plus, consultez la section sur l’utilisation des lampes inactiniques ci-dessous.
Manipulez les films par leurs bords pour éviter les rayures ou éraflures.
Assurez-vous que vos mains sont propres et complètement sèches avant de manipuler des films.
Enlevez toutes les particules de poussière, les fibres de papier ou de plastique qui ont pu se déposer sur le film au cours de la livraison. Si ces particules ne sont pas enlevées avant l’exposition, elles peuvent causer des taches de poussière (piqûres) sur le négatif et salir la colonne du microscope. Pour enlever ces particules, brossez la surface de l’émulsion avec une brosse sèche et propre en poils de chameau. Un jet d’air, d’azote ou de gaz sous pression peut également être utilisé pour souffler ces particules de la surface. Si vous utilisez du gaz sous pression, vérifiez qu’il est propre, sans huile et sec et que la pression de l’air est inférieure à 20 psi : une pression excessive peut endommager la surface de l’émulsion.
Sortez les films de leur emballage et chargez-les dans le support approprié avant prépompage. N’effectuez pas le prépompage du film dans les emballages ouverts contenant du carton de protection : la durée de prépompage sera excessivement prolongée et l’humidité provenant de ces feuilles de carton va polluer rapidement l’huile de la pompe mécanique.
Évitez les expositions critiques sur les bords du film. Les bords extérieurs (6,35 mm) peuvent subir des dommages lors de la manipulation ou du développement.
Utilisation de l’éclairage inactinique
La manipulation et le développement des films de micrographie électronique doivent se faire dans des conditions adéquates d’éclairage inactinique. Carestream Molecular Imaging recommandeune lampe inactinique équipée d'un filtre inactinique GBX et 15 W ampoule dépolie pour une protection maximale et une visibilité plus grande chambre noire.   Une lampe inactinique doit être placée de telle manière qu’elle soit toujours à une distance supérieure ou égale à 1,2 mètre du film.

 

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Éviter les marques statiques 

Lorsque les films font l’objet de frottements, ils peuvent accumuler une charge d’électricité statique positive ou négative, en particulier si l’humidité relative est faible. Le film essaie alors de revenir à un état neutre en transférant les électrons vers ou depuis d’autres objets. Ce transfert peut parfois se produire lentement et n’occasionne aucun effet adverse. Toutefois, il arrive parfois que l’intensification de la charge se fasse plus rapidement que sa dispersion. Dans ces cas, une décharge soudaine produit de la chaleur, lumière et rayon ultraviolet. Ce rayon ultraviolet forme une image latente sur le film sous forme de décharge statique et produit des images indésirables lors du développement de vos négatifs.
Les marques en forme de branche que vous voyez parfois sur des négatifs sont occasionnées par de telles décharges statiques. Elles constituent un signe distinctif d’une charge négative qui s’est déchargée en un petit point ou objet. Les marques statiques peuvent, cependant, prendre une multitude d’autres formes qui ne sont pas facilement reconnaissables. Les taches étendues avec un milieu sombre, par exemple, apparaissent lorsqu’une charge augmente sur le plateau du film et se décharge sur le film.
Pendant la fabrication et l’emballage, Carestream prend toutes les mesures de précaution possibles pour éviter l’accroissement de charges statiques sur des produits sensibles. Vous pouvez éviter les problèmes causés par l’électricité statique en suivant les consignes suivantes :

• Évitez de faire des mouvements brusques qui peuvent causer des frottements lors de la manipulation des films.
• Si possible, maintenez l’humidité relative entre 40 et 60 % dans les endroits où vous chargez et déchargez les films.
• Déplacez les pièces du plateau lentement et retirez doucement les composants lorsque vous chargez ou déchargez un film.

 

 

Les taches rondes avec une partie sombre au centre sont dues à une décharge provenant d’un objet avoisinant sur un film à charge positive.	Les marques statiques en forme de branche sont dues à une décharge provenant d’un petit point ou objet à charge négative.